Thermo 89882 Zeba™ 脫鹽離心柱用戶指南

一、產(chǎn)品概述

Thermo 89882 Zeba™ 脫鹽離心柱是賽默飛世爾科技（Thermo Fisher Scientific）旗下Zeba™系列的核心產(chǎn)品，專為蛋白及生物樣品快速脫鹽設(shè)計(jì)。該離心柱采用7K MWCO（分子量截留值）高性能體積排阻色譜樹脂，通過離心操作實(shí)現(xiàn)高效脫鹽，同時(shí)保留大分子蛋白，適用于手動(dòng)或自動(dòng)液相色譜（LC）前處理流程。

二、技術(shù)規(guī)格

• 截留分子量（MWCO）：7,000 Da

• 適用體積范圍：0.5 mL（單柱容量，支持30–130 µL樣品體積）

• 樹脂類型：專有高性能體積排阻色譜樹脂

• 包裝規(guī)格：25柱/盒（貨號(hào)89882）

• 儲(chǔ)存條件：4°C保存，常溫運(yùn)輸

• 回收率：對(duì)>7,000 Da蛋白回收率≥95%，去除≥95%鹽及小分子污染物（<1,000 Da）

三、核心功能

1. 高效脫鹽

• 通過體積排阻色譜原理，小分子鹽類（如NaCl、Tris等）隨緩沖液流出，大分子蛋白被樹脂截留。

• 兼容高鹽濃度（如1 M NaCl）樣品，無(wú)需稀釋。

2. 高回收率

• 專有樹脂設(shè)計(jì)降低蛋白非特異性結(jié)合，即使低濃度蛋白（25 µg/mL）仍可保持高回收率。

3. 快速操作

• 單次離心（1,000 × g，2分鐘）即可完成脫鹽，無(wú)需色譜系統(tǒng)或樹脂平衡步驟。

• 一張96孔Zeba脫鹽板可在5分鐘內(nèi)處理96份樣品。

4. 兼容性

• 與主流自動(dòng)液相色譜系統(tǒng)（如AKTA）兼容，支持手動(dòng)注射器或自動(dòng)化工作站操作。

四、操作流程

（一）離心柱預(yù)處理

1. 去除儲(chǔ)存液

• 掰斷柱子尾部并松開蓋子，置于15 mL離心收集管中。

• 1,000 × g離心2分鐘，棄去收集管中液體。

2. 樹脂平衡

• 向柱子中加入1 mL緩沖液（如PBS），1,000 × g離心2分鐘，棄去液體。

• 重復(fù)此步驟2–3次，確保樹脂充分平衡。

（二）樣品上樣

1. 樣品加載

• 將柱子置于新收集管中，緩慢加入30–130 µL樣品至樹脂中心。

• 可選壓層：對(duì)于<70 µL樣品，樣品吸收后加入15 µL超純水或緩沖液。

2. 離心脫鹽

• 1,000 × g離心2分鐘，收集管中液體即為脫鹽樣品。

（三）后續(xù)分析

• 脫鹽樣品可直接用于SDS-PAGE、質(zhì)譜分析、酶活性測(cè)定或液相色譜純化。

五、常見問題與解決方案

六、應(yīng)用場(chǎng)景

1. 蛋白質(zhì)組學(xué)：去除樣品中高濃度鹽類，優(yōu)化質(zhì)譜分析結(jié)果。

2. 藥物研發(fā)：快速脫鹽后進(jìn)行藥物-蛋白結(jié)合研究。

3. 生物制藥：緩沖液置換以適應(yīng)下游純化工藝。

4. 高通量篩選：結(jié)合96孔板實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化脫鹽。

七、注意事項(xiàng)

1. 儲(chǔ)存條件：收到后立即4°C保存，避免樹脂干燥。

2. 樣品兼容性：適用于>7,000 Da蛋白，小分子蛋白（如肽段）可能被截留。

3. 安全操作：樹脂懸液含0.05%，避免接觸皮膚或吸入。